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PCR管實(shí)驗(yàn)過程中的注意事項(xiàng)

 更新時(shí)間:2022-10-27    點(diǎn)擊量:1953
  PCR管用聚丙烯(MDPP)配方改良而成,使得產(chǎn)品達(dá)到比同類產(chǎn)品更好的導(dǎo)熱率,快速的反應(yīng)和均一的熱導(dǎo)性。使用高精密小通量模具生產(chǎn)PCR耗材,確保塑料原料在模具中的散布均一性和同步性。從而使每一個(gè)PCR產(chǎn)品具有相似性和均一度。
 
  實(shí)驗(yàn)證明:影響PCR反應(yīng)的關(guān)鍵因素中:PCR儀,酶,鎂離子,緩沖液,引物退火溫度等等,其中PCR耗材的質(zhì)量和PCR儀器溫度準(zhǔn)確性與實(shí)驗(yàn)結(jié)果密切相關(guān),PCR管和PCR板要求具友極薄的管壁和高度均一性。PCR管壁的厚薄會(huì)影響傳熱及傳熱速度。管體的顏色,均一性,透光度等都會(huì)直接影響到PCR,尤其是aPCR(定量PCR)的結(jié)果。
 
  PCR管實(shí)驗(yàn)過程中的注意事項(xiàng):
 
  1、戴一次性手套,若不小心濺上反應(yīng)液,立即更換手套。
 
  2、使用一次性吸頭,嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用,吸頭不要長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染。
 
  3、避免反應(yīng)液飛濺,打開反應(yīng)管時(shí)為避免此種情況,開蓋前稍離心收集液體于管底.若不小心濺到手套或桌。上,應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面。
 
  4、進(jìn)口pcr管操作多份樣品時(shí),制備反應(yīng)混合液,先將dNTP、緩沖液、引物和酶混合好,然后分裝,這樣即可以減少操作,避免污染,又可以增加反應(yīng)的準(zhǔn)確度。
 
  5、加入反應(yīng)模板,加入后蓋緊反應(yīng)管。
 
  6、操作時(shí)設(shè)立陰陽(yáng)性對(duì)照和空白對(duì)照,即可驗(yàn)證PCR反應(yīng)的可靠性,又可以協(xié)助判斷擴(kuò)增系統(tǒng)的可信性。
 
  7、盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,由于加樣器容易受產(chǎn)物氣溶膠或標(biāo)本DNA的污染,使用可替換或高壓處理的加樣器,如沒有這種特殊的加樣器,至少PCR操作過程中加樣器應(yīng)該專用,不能交叉使用,尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加樣器不能拿到其它兩個(gè)區(qū)。
 
  8、重復(fù)實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證結(jié)果,慎下結(jié)論。
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