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polyplus轉(zhuǎn)染試劑jetOPTIMUS®產(chǎn)品說明書

 更新時間:2023-06-29    點擊量:2205

polyplus轉(zhuǎn)染試劑jetOPTIMUS®產(chǎn)品說明書

本說明書以DNA轉(zhuǎn)染為例進(jìn)行說明:

第0天:細(xì)胞接種

→根據(jù)下表在V mL細(xì)胞生長培養(yǎng)基中接種細(xì)胞

培養(yǎng)皿                    

細(xì)胞數(shù)量                    

V=轉(zhuǎn)染過程中培養(yǎng)基的體積                    

96                    

7500 - 25000                    

0.125 mL                    

24                    

40000 - 100000                    

0.5 mL                    

12                    

80000 - 200000                    

1 mL                    

6/35mm                    

150000 - 400000                    

2 mL                    

60mm/25cm2燒瓶                    

200000 - 850000                    

5 mL                    

100mm/75cm2燒瓶                    

1 x 106 - 4 x 106                    

10 mL                    

*備注:對于特定的細(xì)胞類型或懸浮細(xì)胞,請參考完整的方案。

第1天:使用jetOPTIMUS®試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染

→僅使用jetOPTMUS®緩沖液

→以60-80%融合率轉(zhuǎn)染細(xì)胞

36-1.png

培養(yǎng)皿                    

W=jetOPTIMUS®緩沖液的體積                    

X=添加的DNA                    

Y=jetOPTIMUS®體積                    

96                    

12.5 µL                    

0.13 µg                    

0.13-0.19 µL                    

24                    

50 µL                    

0.5 µg                    

0.5-0.75 µL                    

12                    

100 µl                    

1 µg                    

1-1.5 µL                    

6/35mm                    

200 µl                    

2 µg                    

2-3 µL                    

60mm/25cm2燒瓶                    

500 µl                    

4 µg                    

4-6 µL                    

100mm/75cm2燒瓶                    

1000 µl                    

10 µg                    

10-15 µL                    


第2-3天:測量基因表達(dá)

protocol優(yōu)化:

(1)測試不同的DNA量:X、0.5 X和1.5 X。

(2)測試不同的DNA/jetOPTIMUS®比例,1:1至1:1.5。

(3)有關(guān)細(xì)胞特異性協(xié)議,請聯(lián)系益元利康客服獲取。

培養(yǎng)皿                    

W=jetOPTIMUS®緩沖液的體積                    

X=添加的DNA                    

Y=jetOPTIMUS®體積                    

96                    

12.5 µL                    

0.10-0.20 µg                    

0.10-0.30 µL                    

24                    

50 µL                    

0.25-0.75 µg                    

0.25-1 µL                    

12                    

100 µl                    

0.5-1.5 µg                    

0.5-2.25 µL                    

6/35mm                    

200 µl                    

1-3 µg                    

1-4.5 µL                    

60mm/25cm2燒瓶                    

500 µl                    

2-6 µg                    

2-9 µL                    

100mm/75cm2燒瓶                    

1000 µl                    

5-15 µg                    

5-22 µL                    


提高敏感細(xì)胞細(xì)胞活力的提示:

(1)轉(zhuǎn)染后4小時更換培養(yǎng)基。

(2)將DNA量減少到0.5倍,同時保持之前使用的DNA/jetOPTIMUS®比例。

(3)在較早的時間點(例如轉(zhuǎn)染后24小時而不是48小時)分析轉(zhuǎn)染。

(4)在敏感細(xì)胞的還原血清培養(yǎng)基中進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

(5)檢查靶基因是否影響細(xì)胞活力。

(6)確保細(xì)胞在轉(zhuǎn)染前已傳代兩次以上且少于20次。

(7)丟棄過度培養(yǎng)的細(xì)胞。

良好的DNA轉(zhuǎn)染實踐:

(1)適當(dāng)儲存jetOPTIMUS®(5±3°C)。

(2)定期檢查支原體污染情況。

(3)使用報告基因來建立和優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件。

(4)血清質(zhì)量可能嚴(yán)重影響轉(zhuǎn)染效率。購買新一批血清時或胰蛋白酶檢查細(xì)胞活力以及轉(zhuǎn)染效率。

更多有關(guān)polyplus轉(zhuǎn)染試劑jetOPTIMUS®產(chǎn)品說明書的內(nèi)容,請聯(lián)系益元利康客服!

polyplus轉(zhuǎn)染試劑jetOPTIMUS®產(chǎn)品說明書提供商——天津益元利康生物科技有限公司成立于2018年,坐落于天津經(jīng)濟技術(shù)開發(fā)區(qū)。公司產(chǎn)品線涉及細(xì)胞與基因治療、免疫學(xué)、分子

生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等多個方向,專注于生命科學(xué)試劑、耗材、細(xì)胞、儀器等產(chǎn)品銷售,經(jīng)營的品牌主要有:ThermoFisher、

Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam、polyplus等等。我們提供質(zhì)優(yōu)價美的產(chǎn)品、及時到位的服務(wù),

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