日本无翼乌邪恶大全彩h下拉式,老师洗澡时让我进去摸她那个,亚洲欧美自偷自拍另类小说 ,rapper国内女rapper

歡迎來(lái)到天津益元利康生物科技有限公司網(wǎng)站!

022-66387942
關(guān)鍵詞搜索:尿素測(cè)定試劑盒,MedKoo代理,Permagen磁架
Technical articles技術(shù)文章
首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 免疫熒光實(shí)驗(yàn)流程有哪些?

免疫熒光實(shí)驗(yàn)流程有哪些?

 更新時(shí)間:2023-10-09    點(diǎn)擊量:674

免疫熒光是一種常用的光學(xué)顯微術(shù),即用熒光顯微鏡來(lái)觀察細(xì)胞中的特定生物分子。免疫熒光依賴于抗體抗原的特異性結(jié)合,然后通過(guò)直接標(biāo)記或間接標(biāo)記方法使用熒光分子指征抗體-抗原結(jié)合的位置,以確定目標(biāo)生物分子在細(xì)胞中的位置、豐度和分布情況。那么你知道免疫熒光實(shí)驗(yàn)流程有哪些嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!

1. 固定

固定液種類:有機(jī)溶劑(甲醇、乙醇、丙酮等);交聯(lián)劑(4%PFA、10%中性福爾馬林),固定液的選擇取決于被研究抗原的性質(zhì)及所用抗體的特性。但針對(duì)磷酸化的抗體,不適合用甲醛,會(huì)導(dǎo)致磷酸蛋白從膜表面轉(zhuǎn)移到胞漿中,故應(yīng)選擇冰冷的無(wú)水甲醇或無(wú)水乙醇,同時(shí)應(yīng)注意甲醛會(huì)揮發(fā),在4-8°C不宜儲(chǔ)存太久。

固定時(shí)間:取決于組合塊的大小和類型,對(duì)于大多數(shù)組織,18-24h較為理想,細(xì)胞固定時(shí)間較短,一般2%的甲醛室溫固定20min即可。

2. 透化

通透的目的是使抗體進(jìn)入胞內(nèi)。0.5% Triton X-100 室溫通透20 min(針對(duì)胞內(nèi)抗原,若是細(xì)胞膜上表達(dá)的抗原則省略該步驟);除了Triton X-100,丙酮也可作為通透劑,并且丙酮固定后的樣品不需要通透。

3. 封閉

封閉可減少一抗和二抗與非特異性位點(diǎn)結(jié)合。通透后用PBS浸洗玻片3次,每次3 min,吸水紙吸干PBS,在玻片上滴加山羊血清,室溫封閉30min。常用的封閉液包括:與二抗同一來(lái)源的血清、BSA或者是羊血清。從封閉開始所有的步驟,一定要注意樣品的保濕,避免樣品的干燥,否則極易產(chǎn)生較高的背景。醛類固定的樣品,在用一抗孵育前用含0.3M甘氨酸的封閉液進(jìn)行封閉。

4. 一抗孵育

根據(jù)一抗說(shuō)明書,按照適當(dāng)比例用一抗稀釋液稀釋一抗,用吸水紙吸盡封閉液,每張玻片滴加稀釋好的一抗并放入濕盒, 4℃孵育過(guò)夜?;厥找豢梗尤隤BST, 在搖床上緩慢搖動(dòng)洗滌5 min,共洗滌3次。

5. 熒光二抗孵育

用吸水紙吸盡洗滌液后滴加稀釋好的熒光二抗,濕盒中孵育1h后,回收二抗,接著用PBST洗3次,每次5 min;由于熒光容易淬滅,故從加熒光二抗起,后面所有操作步驟都要避光。

6. 復(fù)染核(定位的關(guān)鍵)

在玻片上滴加DAPI,并注意避光孵育5min,對(duì)標(biāo)本進(jìn)行染核,然后用PBST洗3次,每次5min,洗去多余的DAPI。

7. 封片

用吸水紙吸干爬片上的液體,用含抗熒光淬滅劑的封片液封片,然后在熒光顯微鏡下觀察。

更多有關(guān)免疫熒光實(shí)驗(yàn)流程的內(nèi)容,請(qǐng)聯(lián)系天津益元利康生物科技有限公司:




掃一掃,關(guān)注微信
地址:天津市經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)洞庭湖路220號(hào) 傳真:
版權(quán)所有 © 2025 天津益元利康生物科技有限公司  備案號(hào):津ICP備2022004463號(hào)-1

聯(lián)


性一交一乱一乱一视一频| 色偷偷色嚕噜狠狠网站| 寺庙双乳高耸嗯啊h| 亚洲精品一区中文字幕乱码| 亚洲午夜精品一区二区| 国产一产二产三精华液区别在哪里 | 校花张开腿疯狂娇吟k视频| 猛烈撞击灌满白浊花液h| 印度肥妇黑毛bbw| 精品人妻无码一区二区三区4| 真人性囗交69图片| 高潮vpswindows国产乱| 年轻丰满的继牳理伦片中文| 裸体跳舞xxxx裸体跳舞| 金鸽源赛鸽公棚春棚| 疯狂做受xxxx高潮欧美日本| 免费看撕开奶罩揉吮奶头视频| 亚洲6080yy久久无码国产| 樱桃视频影院在线播放| 精品熟女60老妇av免| 亚洲精品一区二区三区四区五区| 老张和老李互相换女h| 花蜜花液汁水野战高h| 白白嫩嫩又小又紧| 熟妇与小伙子matur老熟妇e| 人妻上司厨房出轨2hd院线| 亚洲 精品 综合 精品 自拍| 日本真人做爰免费的视频| 国产乱码精品一区二区三区中文| 欧美性做爰片免费视频看不忠| 猛烈撞击灌满白浊花液h| 国自产拍偷拍精品啪啪模特| 日本16岁rapper| 护士趴下光屁股翘臀被打的作文| 仙踪林国精产品视频| 啊轻点灬太粗嗯太深了| 电影巜喂不饱的妻子| 亚洲av综合av一区二区三区| 丰满人妻妇伦又伦精品app| 18禁喷水流白浆自慰视噜噜噜| 真人做爰45分钟|