日本无翼乌邪恶大全彩h下拉式,老师洗澡时让我进去摸她那个,亚洲欧美自偷自拍另类小说 ,rapper国内女rapper

歡迎來到天津益元利康生物科技有限公司網(wǎng)站!

022-66387942
關(guān)鍵詞搜索:尿素測定試劑盒,MedKoo代理,Permagen磁架
Technical articles技術(shù)文章
首頁 > 技術(shù)文章 > PCR反應(yīng)污染的處理方法有哪些?

PCR反應(yīng)污染的處理方法有哪些?

 更新時間:2023-10-13    點擊量:729

PCR反應(yīng)的特點是具有較大擴(kuò)增能力與靈敏性,但令人頭痛的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生。那么你知道PCR反應(yīng)污染的處理方法有哪些嗎?讓我們一起來看看吧!

一、環(huán)境污染

1. 稀酸處理法:對可疑器具用1mol/L鹽酸擦拭或浸泡,使殘余DNA脫嘌呤。

2. 紫外照射(UV)法:紫外波長(nm)一般選擇254/300nm,照射30min即可。需要注意的是,選擇UV作為消除殘留PCR產(chǎn)物污染時,要考慮PCR產(chǎn)物的長度與產(chǎn)物序列中堿基的分布,UV照射僅對500bp以上長片段有效,對短片段效果不大。UV照射時,PCR產(chǎn)物中嘧啶堿基會形成二聚體,這些二聚體可使延伸終止,但并不是DNA鏈中所有嘧啶均能形成二聚體,且UV照射還可使二聚體斷裂。形成二聚體的程度取決于UV波長,嘧啶二聚體的類型及與二聚體位點相鄰核苷酸的序列。

二、反應(yīng)液污染

1. DNaseI法:PCR混合液(未加模板和Taq聚合酶)加入0.5UDNaseI,室溫反應(yīng)30min后加熱滅活,然后加入模板和Taq聚合酶進(jìn)行正常PCR擴(kuò)增。該方法的優(yōu)點是不需要知道污染DNA的序列。

2. 內(nèi)切酶法:選擇識別4個堿基的內(nèi)切酶(如MspI和TaqI等),可同時選擇幾種,以克服用一種酶只能識別特定序列的缺陷,室溫作用1h后加熱滅活進(jìn)行PCR。

3. 紫外照射法:未加模板和Taq聚合酶的PCR混合液進(jìn)行紫外照射,注意事項與方法同上述UV照射法。

4. g射線輻射法:1.5kGy的輻射可wan全破壞0.1ng基因組DNA,2.0kGy可破壞104拷貝的質(zhì)粒分子,4.0kGy仍不影響PCR,但高于此限度會使PCR擴(kuò)增效率下降。引物可受照射而不影響PCR,g射線是通過水的離子化產(chǎn)生自由基來破壞DNA的。

三、固相捕獲法

用于去除標(biāo)本中污染的核酸和雜質(zhì),原理如下:

1. 用生物素標(biāo)記的單鏈RNA探針與待擴(kuò)核酸雜交,雜交區(qū)域是非擴(kuò)增區(qū)。

2. 用包被鏈霉親和素的固相載體來捕獲帶有生物素探針的雜交核酸,通過漂洗可去除污染的擴(kuò)增產(chǎn)物和雜質(zhì)。

3. 洗脫靶分子后用特異引物擴(kuò)增非RNA探針雜交區(qū)域。第2步的漂洗后可用PCR檢測以確定標(biāo)本是否被擴(kuò)增產(chǎn)物或重組質(zhì)粒污染。

四、抗污染引物法

該對引物擴(kuò)增時通過病毒DNA克隆如入質(zhì)粒的位點。這一區(qū)域只存在完整的原病毒中,在重組質(zhì)粒中,這一區(qū)域分成兩個區(qū)域與克隆位點被。如果重組質(zhì)粒污染了標(biāo)本,也不能擴(kuò)增出任何條帶,即使出現(xiàn)了擴(kuò)增帶,其大小也與預(yù)期的不同。只有原病毒DNA才能被引物擴(kuò)增,因此只要出現(xiàn)預(yù)期大小的擴(kuò)增帶就可以證明標(biāo)本是陽性的,該法試用于環(huán)狀靶分子系列。

更多有關(guān)PCR反應(yīng)污染的處理方法,請聯(lián)系天津益元利康生物科技有限公司:


掃一掃,關(guān)注微信
地址:天津市經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)洞庭湖路220號 傳真:
版權(quán)所有 © 2025 天津益元利康生物科技有限公司  備案號:津ICP備2022004463號-1

聯(lián)


黑人bbcvideos极品| 夜玩亲女裸睡的小妍h| chinesegv无套粗大激情| 成人午夜剧场| 欧美性猛交aaaa片黑人| √最新版天堂资源网在线| 色妞ww精品视频7777| 我的特种兵男友| 日韩精品成人无码亚洲av无码 | 美女脱内衣让男生揉摸的视频 | 美妙人妻系列| 风间ゆみの熟女俱乐部| 亚洲av无码乱码在线观看性色| 日韩在线视频| 国产偷v国产偷v国产高清| 玩弄朋友娇妻呻吟交换电影| 14MAY18XXXXXL日本| 寂寞少妇在哪个软件能约到| 暴虐sm灌浣肠调教a片男男| 国产亚洲精品久久yy50| 国产无遮挡又黄又爽在线观看| 欧美av在线观看| 真人性囗交69图片| 野外做受又硬又粗又大视频√| 丰满人妻中伦妇伦精品app| 欧美+国产+日产| 最新中文字幕av专区| 永久免费的网站在线观看| 无码精品人妻一区二区三区人妻斩 | 美女做爰a片毛片aaaa| 久久久亚洲精品无码| 我半夜摸妺妺的奶摸到高潮 | 丰满岳跪趴高撅肥臀| 国产视频一区二区| 性xxxx视频播放免费| 掀起裙子扶着巨物坐下去| 国产午夜精品一区二区| 日本特黄特色aaa大片免费| 亚洲精品99久久久久中文字幕| 《特殊的精油按摩3》| 男人一边吻奶边挵进去免费软件|