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細胞被支原體污染,該怎么辦?

 更新時間:2023-10-18    點擊量:709

支原體是目前為止發(fā)現(xiàn)的最小的原核生物,支原體污染一般在顯微鏡下不可見,很難察覺,但細胞會受到極大的損傷,主要通過以下途徑影響細胞生長及功能。那么細胞被支原體污染,該怎么辦呢?讓我們一起來看看吧!

一、支原體污染的來源

1. 環(huán)境污染:如細胞培養(yǎng)房、細胞培養(yǎng)箱、超凈工作臺內(nèi)已被支原體污染;

2. 實驗器材的污染:移液槍、移液管、細胞培養(yǎng)皿、水浴鍋等;

3. 細胞培養(yǎng)試劑的污染:培養(yǎng)基、胰酶、血清、細胞凍存液等;

二、處理方法

1. 及時更換培養(yǎng)液:可以減緩支原體的污染,但不能wan全清除;

2. 使用抗生素類去除試劑:抗生素對支原體有較好的抑制作用,可以有效清除支原體,但長時間使用抗生素,會產(chǎn)生耐藥性的風(fēng)險。在使用單一抗生素清除效果不佳時,可以考慮更換抗生素或者采用復(fù)合型抗生素試劑;

3. 使用非抗生素去除試劑:非抗生素清除試劑不會產(chǎn)生耐藥性,對支原體的清除效果可以達到100%,且?guī)缀鯇毎麤]有影響,是去除支原體的shou選試劑。

4. 實驗室環(huán)境清潔:發(fā)生支原體污染后,應(yīng)及時處理已被污染的細胞,并對細胞房進行che底的清潔和消殺,防止交叉污染。

三、預(yù)防方法

1. 定期消毒:定期對細胞房、實驗服、移液槍、細胞培養(yǎng)箱等進行消毒,及時清除支原體;

2. 檢查細胞培養(yǎng)試劑:選擇來源可靠的試劑及耗材產(chǎn)品,在進行細胞培養(yǎng)操作之前,檢查細胞培養(yǎng)基、血清、胰酶等試劑,可選擇合適孔徑的濾膜進行過濾除菌,使用過程中如發(fā)現(xiàn)有污染應(yīng)及時更換;

3. 規(guī)范細胞培養(yǎng)操作:建立良好的細胞培養(yǎng)操作SOP,遵循無菌操作原則,規(guī)范穿戴實驗服、口罩、手套等,并在細胞培養(yǎng)開始時進行消毒;規(guī)范處理實驗廢棄物;

4. 在培養(yǎng)基中加入支原體預(yù)防試劑:

加入抑制支原體DNA合成的抗生素:例如氟喹諾酮類抗生素;

加入抑制支原體蛋白質(zhì)合成的抗生素:例如大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素、雙萜烯類等抗生素;

加入非抗生素類支原體清除試劑:如膜活性多肽,通過與支原體膜特異性結(jié)合che底清除支原體。

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