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ELISA檢測時樣本實驗準備步驟有什么?

 更新時間:2023-11-27    點擊量:888

在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。那么你知道ELISA檢測時樣本實驗準備步驟都有什么嗎?讓我們一起來看看吧!

1. 血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

2. 血漿

應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

3. 尿液

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。

4. 細胞培養上清

 檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右-3000/分)。仔細收集上清。

5. 培養細胞

檢測細胞內的成份時,用PBSPH72-74)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

6. 組織標本

切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

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