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細(xì)胞克隆的原理與分類

 更新時間:2024-01-12    點擊量:980

細(xì)胞克隆形成實驗是用來檢測細(xì)胞增殖能力、侵襲性、對殺傷因素敏感性等項目的重要技術(shù)方法。那么你知道細(xì)胞克隆的原理與分類嗎?讓我們一起來看看吧!

一、原理

當(dāng)單個細(xì)胞在體外增殖6代以上,其后代所組成的細(xì)胞群體,成為集落或克隆。其中細(xì)胞克隆形成率即細(xì)胞接種存活率,表示接種細(xì)胞后貼壁的細(xì)胞成活并形成克隆的數(shù)量。貼壁后的細(xì)胞不一定每個都能增殖和形成克隆,而形成克隆的細(xì)胞必為貼壁和有增殖活力的細(xì)胞。克隆形成率反映細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。

二、克隆形成的目的

1)檢測細(xì)胞經(jīng)干預(yù)處理后的克隆形成能力來判斷干預(yù)后是否影響細(xì)胞的增殖和存活能力;

2)評價不同殺傷因素(藥物、基因等)對腫瘤細(xì)胞增殖能力或群體依賴性的敏感性;

3)評價細(xì)胞在體內(nèi)成瘤性:腫瘤細(xì)胞不一定都可以在體內(nèi)成瘤,若體外克隆能力越強(qiáng),即表明體內(nèi)成瘤性越強(qiáng),算是一種模擬體內(nèi)成瘤的體外實驗。

三、克隆形成依據(jù)采用的培養(yǎng)介質(zhì)的不同,分為平板克隆和軟瓊脂克隆兩類

1. 平板克隆形成(Colony formation):細(xì)胞培養(yǎng)在培養(yǎng)基中,應(yīng)用于貼壁的細(xì)胞。

2. 軟瓊脂克隆形成(soft agar colony formation):細(xì)胞被瓊脂糖掛起來,主要應(yīng)用于懸浮的腫瘤細(xì)胞和轉(zhuǎn)化細(xì)胞系。

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