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EZBioscience microRNA加尾法逆轉(zhuǎn)錄試劑盒的產(chǎn)品優(yōu)勢有哪些?

 更新時間:2024-01-15    點擊量:635

EZBioscience® microRNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒采用一步法中的Poly(A)拖尾反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)方法合成miRNA的第一鏈cDNA。通過使用大腸桿菌Poly(A)聚合酶通過添加Poly(A)來延長成熟轉(zhuǎn)錄本的3' 端,修飾來自總RNA的成熟miRNA。然后,修飾的miRNA使用Oligo(dT)通用標(biāo)簽引物進行通用逆轉(zhuǎn)錄,以合成所有miRNA的第一鏈cDNA。其中,gDNA Remover主要包括濃縮的DNase和緩沖液。只需在室溫(19~27°C)下反應(yīng)5分鐘即可降解95%以上的殘留基因組DNA,大大降低了對結(jié)果的干擾。

miRNA RT 酶混合物主要包含大腸桿菌 Poly(A)聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶和 RNase 抑制劑。大腸桿菌Poly(A)聚合酶不僅具有高效的Poly(A)拖尾反應(yīng)效率,而且特異性識別成熟的單鏈miRNA,從而避免了雙鏈結(jié)構(gòu)miRNA前體的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。突變體M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶具有很強的抗干擾能力和擴增能力。

4×miRNA RT緩沖液試劑包含Poly(A)拖尾反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的所有原料和引物,包括 Oligo(dT)-通用標(biāo)簽引物、緩沖液和dNTP,并經(jīng)過精心優(yōu)化,確保 Poly(A)拖尾反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)高效。

1.操作快速簡單:本試劑盒采用Poly(A)拖尾反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)法一步法合成miRNAs第一鏈cDNA。無需設(shè)計額外的逆轉(zhuǎn)錄引物。30 分鐘內(nèi)即可獲得包含所有 miRNA 的高質(zhì)量 cDNA。

2.特異性高:Poly(A)聚合酶不僅具有較高的A-tailing效率,而且特異性識別成熟的單鏈miRNA,從而避免了雙鏈結(jié)構(gòu)miRNA前體的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。

3.高效:該試劑盒采用高效Poly(A)聚合酶和逆轉(zhuǎn)錄酶的優(yōu)化組合,可高效進行Poly(A)拖尾和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。與普通商業(yè)逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品相比,該試劑盒以最小的定量CT值逆轉(zhuǎn)cDNA,具有優(yōu)異的逆轉(zhuǎn)錄效率。

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