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NEB T4 DNA連接酶(M0202V)現(xiàn)貨供應(yīng)

 更新時間:2024-02-29    點(diǎn)擊量:835

基因工程中用到的連接酶主要是大腸桿菌DNA連接酶以及T4 DNA連接酶,目前后者的應(yīng)用更為廣泛。T4 DNA連接酶可以修補(bǔ)雙鏈DNA、雙鏈RNA或DNA/RNA雜合鏈上的單鏈切口,使兩個相鄰的核苷酸連接起來,在DNA修復(fù)和重組中起著重要的作用。下面讓我們一起來看看NEB T4 DNA連接酶(M0202V)的產(chǎn)品介紹。

NEB T4 DNA連接酶可以催化雙鏈DNA或RNA中并列的5'磷酸鹽和3'羥基末端之間形成磷酸二酯酶鍵。這種酶將連接鈍端和內(nèi)聚端,并修復(fù)雙鏈DNA和一些DNA/RNA雜交體中的單鏈缺口。

操作方法:

1. 在冰上的微量離心管中設(shè)置以下反應(yīng)。

image.png

* T4 DNA 連接酶緩沖液應(yīng)解凍并在室溫下重懸。

2. 通過上下移液和微量離心輕輕混合反應(yīng)。

3. 對于粘性(粘性)末端,在 16°C 下孵育過夜或室溫孵育 10 分鐘。

4. 對于鈍端或單堿基突出端,在 16°C 下孵育過夜或室溫孵育 2 小時(或者,5. 高濃度 T4 DNA 連接酶可用于 10 分鐘的連接)。

6. 在 65°C 下加熱滅活 10 分鐘。

7. 在冰上冷卻并將1-5μl反應(yīng)物轉(zhuǎn)化為50μl感受態(tài)細(xì)胞。

產(chǎn)品選購:

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

M0202V

T4 DNA 連接酶

10,000 units

 


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