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索萊寶Solarbio小鼠脾臟淋巴細胞分離液試劑盒(P8860)現(xiàn)貨供應(yīng)

 更新時間:2024-04-10    點擊量:455

產(chǎn)品名稱:索萊寶Solarbio小鼠脾臟淋巴細胞分離液試劑盒(P8860)現(xiàn)貨供應(yīng)

產(chǎn)品貨號:P8860

產(chǎn)品品牌:索萊寶

產(chǎn)品簡介:

規(guī)格

200mL/KIT

有效期

2

儲存條件

RT,避光

單位

產(chǎn)品組成:

各種動物脾臟淋巴細胞分離液

200mL

全血及組織稀釋液

200mL

細胞洗滌液

200mL

實驗流程:

淋巴細胞分離方法(僅供參考)

1. 制備脾臟的單細胞懸液。

2. 取一支適當?shù)碾x心管,加入與脾臟單細胞懸液等量的分離液(分離液最少不得少于3 mL,總體積不能超過離心管的三分之二,否則會影響分離效果)。

3. 小心吸取單細胞懸液加于分離液液面上,注意保持兩液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取單細胞懸液,然后小心的平鋪于分離液上,因為兩者的密度差異,將形成明顯的分層界面。)

4. 室溫,水平轉(zhuǎn)子500~900g,離心20~30min。(根據(jù)脾臟單細胞懸液的量確定離心條件,單細胞懸液量越大,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件可以自行摸索,以達到最佳分離效果)。

5. 離心后,此時離心管中由上至下細胞分四層。第一層為稀釋液層;第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層;第三層為透明分離液層;第四層為紅細胞層。

6. 用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色淋巴細胞至另一潔凈的 15mL離心管中,向離心管中加入10ml細胞洗滌液洗滌白膜層細胞,250g,離心10min。

7. 棄上清,5mLPBS或細胞清洗液重懸細胞,250g,離心 10min

8. 重復步驟7

9. 棄上清,細胞重懸備用。

脾臟單細胞懸液的制備方法(僅供參考)

脾臟研磨的方法:

1. 無菌條件下摘取脾臟,撕去脾臟被膜,用眼科剪將脾臟剪成小塊。

2. 將尼龍篩網(wǎng)或者是細胞過濾篩放置于平皿上,加入少量全血及組織稀釋液(保證脾臟及獲得的細胞處于液體環(huán)境中)。

3. 將脾臟放置于篩網(wǎng)上,使用注射器活塞或者是無菌鑷子來研磨脾臟(盡量控制研磨力度,保持篩網(wǎng)懸空,避免在皿底上直接研磨而造成大批細胞死亡)

4. 研磨后使用全血及組織稀釋液沖洗篩網(wǎng),收集細胞懸液,再經(jīng)濾網(wǎng)過濾。

相關(guān)文獻:

[1] Yuying Liu,Xiaoyu Liang,Wenqian Dong,et al. Tumor-Repopulating Cells Induce PD-1 Expression in CD8+ T Cells by Transferring Kynurenine and AhR Activation. Cancer cell. March 2018. (IF 23.916)

[2] Qiushuang Zhang,Chao Xie,Dongyu Wang,et al. Improved Antitumor Efficacy of Combined Vaccine Based on the Induced HUVECs and DC-CT26 Against Colorectal Carcinoma. Cells. May 2019. (IF 5.656)

歡迎訂購:

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

P8860

小鼠脾臟淋巴細胞分離液試劑盒

200mL/KIT

 

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