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細(xì)菌活化的方法

 更新時間:2024-06-13    點(diǎn)擊量:864
  菌種活化就是將保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng),逐級擴(kuò)大培養(yǎng)得到純而壯的培養(yǎng)物,即獲得活力旺盛的、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復(fù)壯過程,因?yàn)楸4鏁r的條件往往和培養(yǎng)時的條件不相同,所以要活化,讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境。下面讓我們一起來看看細(xì)菌活化的方法吧!
 
  一、一般菌種臨時存放及活化
 
  1.低溫保存管應(yīng)存放于-20℃ ~ -80℃之低溫條件下。
 
  2.準(zhǔn)備 37℃之 70﹪酒精浴槽(只能在電氣水浴槽中改放酒精,不可以火加溫,以免危險;若以 37℃水浴取代,應(yīng)避免水中微生物污染),其中事先安放小試管架,液面不可高達(dá)管塞。
 
  3.將低溫保存管從低溫保存條件中取出,置于 37℃浴槽之小試管架上。
 
  4.不斷輕微搖動低溫保存管,液面不可高至管塞,直至結(jié)冰溶解(約需 2 分鐘)。
 
  二、無菌培養(yǎng)
 
  1.用無菌微量吸管,從已溶解之低溫保存管 吸取 1-2滴之菌液,滴入固態(tài)培養(yǎng)基某一邊緣附近,以劃線法接種于培養(yǎng)基。
 
  2.將接種好的培養(yǎng)基置于指定溫度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
 
  三、平板劃線分離法
 
  平板劃線分離法是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落,通常把這種單菌落當(dāng)作待分離微生物的純種。有時這種單菌落并非都由單個細(xì)胞繁殖而來的,故必須反復(fù)分離多次才可得到純種。其原理是將微生物樣品在固體培養(yǎng)基表面多次作“由點(diǎn)到線”稀釋而達(dá)到分離目的的。
 
  1.手持金屬接種環(huán),用酒精燈將接種環(huán)(共約5cm)燒至火紅,并不斷來回?zé)窘饘俟潭U之前約10公分,等待約10秒鐘,將接種環(huán)前端輕觸培養(yǎng)基邊緣凝膠(無菌體部份),待接種環(huán)冷卻后,以環(huán)沾黏菌滴,由培養(yǎng)基邊緣向中央輕輕橫劃緊接的并行線,直到涵蓋1/3培養(yǎng)基為止。
 
  2.灼燒接種環(huán),待數(shù)秒冷卻后,旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)基自I區(qū)涂布的邊緣再橫劃數(shù)條線到未接種的區(qū)域。
 
  3.重復(fù)2的動作完成。
 
  4.灼燒接種環(huán),將接種環(huán)歸位。
 
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