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Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒的常見(jiàn)問(wèn)題

 更新時(shí)間:2023-11-03    點(diǎn)擊量:1257
  你知道Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
 
  一、RNA效率低的原因:
 
  1)樣品裂解或勻漿處理不干凈;
 
  2)最后得到地RNA沉淀未溶解;
 
  3)樣品勻漿時(shí)加的TRIzol過(guò)少;
 
  4)勻漿樣品后未在室溫下放至5分鐘;
 
  5)吸取水相時(shí)混有有機(jī)相;
 
  6)RNA沉淀未溶解等。
 
  二、A260/A280<1.65的原因:
 
  1)檢測(cè)吸光度時(shí),RNA樣品不是溶于TE,而是溶于水。低離子濃度和低PH條件下,A280值會(huì)較高;
 
  2)樣品勻漿時(shí)加地試劑量太少;
 
  3)勻漿后樣品未在室溫放置2分鐘;
 
  4)水相中混有有機(jī)相;
 
  5)最后得到地RNA沉淀未溶解;
 
  三、RNA降解原因:
 
  1)組織取出后沒(méi)有馬上處理或冷凍;
 
  2)樣品或提取地RNA沉淀保存于-5℃-20℃,未在-60℃-70℃保存;
 
  3)細(xì)胞在胰酶處理時(shí)被破壞;
 
  4)溶液或離心管未經(jīng)RBase去處理;
 
  四、Ezb DNA/RNA/組織提取試劑盒的使用注意事項(xiàng):
 
  1)在進(jìn)行RNA提取實(shí)驗(yàn)時(shí),使用獨(dú)立的RNA提取專(zhuān)用試驗(yàn)臺(tái);
 
  2)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中穿好實(shí)驗(yàn)服,佩戴一次性滅菌手套,佩戴口罩,避免講話(huà)交流等,防止您的唾液和汗液中的RNaes酶污染實(shí)驗(yàn);
 
  3)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中盡量使用一次性滅菌滅酶的塑料器皿,若不得不使用玻璃器皿,可以選擇使用0.1%的DEPC水浸泡處理24 h后再高壓滅菌去除DEPC,也可以使用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌;
 
  4)RNA提取實(shí)驗(yàn)中使用的所有器具及耗材都建議專(zhuān)門(mén)使用,并建議耗材設(shè)立一個(gè)獨(dú)立的區(qū)域存放,不與其他實(shí)驗(yàn)混用;
 
  5)RNA提取實(shí)驗(yàn)中所用的試劑也應(yīng)專(zhuān)用,不與其他實(shí)驗(yàn)混用,所用的無(wú)菌水需要使用0.1%的DEPC處理后進(jìn)行高壓滅菌。
 
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