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肝癌3D類器官培養(yǎng)基

簡(jiǎn)要描述:肝癌3D類器官培養(yǎng)基(Hepatocarcinoma Organoid Medium)是一種為促進(jìn)肝癌類器官體外形成和擴(kuò)增而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。它是一種無(wú)菌的液體混合系統(tǒng),含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機(jī)和無(wú)機(jī)化合物、激素、生長(zhǎng)因子、微量礦物質(zhì)等。該培養(yǎng)基的*配方可以提供一個(gè)較適合的細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,選擇性地促進(jìn)體外人肝癌類器官的生長(zhǎng)。

  • 產(chǎn)品型號(hào):PRS-HCM-3D
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2024-11-21
  • 訪  問(wèn)  量:1953
詳情介紹

肝癌3D類器官培養(yǎng)基產(chǎn)品說(shuō)明肝癌類器官培養(yǎng)基(Hepatocarcinoma Organoid Medium)是一種為促進(jìn)肝癌類器官體外形成和擴(kuò)增而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。它是一種無(wú)菌的液體混合系統(tǒng),含有必需和非必需的氨基酸、維生素、有機(jī)和無(wú)機(jī)化合物、激素、生長(zhǎng)因子、微量礦物質(zhì)等。該培養(yǎng)基的*配方可以提供一個(gè)較適合的細(xì)胞所需營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,選擇性地促進(jìn)體外人肝癌類器官的生長(zhǎng)。

肝癌3D類器官培養(yǎng)基產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
(1) 培養(yǎng)成功率高

(2) 體外持續(xù)擴(kuò)增

(3) 保持腫瘤特征

(4) 藥敏結(jié)果與臨床數(shù)據(jù)接近

使用說(shuō)明:
?  實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1)消化好的肝癌原代細(xì)胞懸液15mL無(wú)菌離心管、1.5mL離心管、24孔細(xì)胞培養(yǎng)板、移液器、移液管、無(wú)菌槍頭等表面消毒后放入超凈工作臺(tái)中紫外照射30 min。
2)提前30min從4℃冰箱取出肝癌類器官培養(yǎng)基平衡至室溫,提前從-20℃冰箱取出所需體積的基質(zhì)膠冰上融化。

?  癌類器官培養(yǎng)
1)將消化好的肝癌細(xì)胞懸液計(jì)數(shù),按照1-2萬(wàn)細(xì)胞每孔計(jì)算所需的細(xì)胞數(shù),根據(jù)計(jì)算好的體積吸取細(xì)胞懸液加入預(yù)冷的1.5mL離心管中。
2)補(bǔ)齊預(yù)冷的DMEM/F12至所需體積,將預(yù)冷后的細(xì)胞懸液加入等體積的基質(zhì)膠中輕輕混勻(全程冰上操作),然后將細(xì)胞與基質(zhì)膠的混合液按照40μL/孔接種于24孔板。
3)將接種好的培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱至少30min,待基質(zhì)膠*凝固,然后沿24孔壁每孔緩慢加入500μL預(yù)先恢復(fù)至室溫的類器官培養(yǎng)基,3天后鏡下觀察類器官形成情況,粒徑大于50μm即認(rèn)為類器官已經(jīng)形成,每5天更換一次培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),持續(xù)觀察類器官大小,鏡下觀察大部分類器官大小均大于50μm且大小不再增大即可收集類器官進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

?  癌類器官收集
1)吸去培養(yǎng)基,每孔加入200μL基質(zhì)膠解離試劑。

2)輕輕吹打混勻,收集至15mL離心管中,37℃解離30min(具體解離時(shí)間根據(jù)實(shí)際情況決定,以無(wú)明顯大塊膠狀物為準(zhǔn)),解離之后1500rpm離心3min,輕輕吸去上清,待用。
?  癌類器官傳代
1)解離之后的細(xì)胞加入適量的消化酶,37℃,200rpm消化(具體時(shí)間根據(jù)類器官大小和數(shù)量決定,以無(wú)肉眼可見顆粒為準(zhǔn))。

2)消化*后1500rpm離心3min,輕輕吸去上清,使用終止培養(yǎng)基重懸后1500rpm離心3min,加入預(yù)冷的DMEM/F12培養(yǎng)基進(jìn)行重懸,計(jì)數(shù),按照培養(yǎng)步驟操作繼續(xù)培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
1.本產(chǎn)品在使用前需平衡至室溫。
2.使用產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免污染。
3.為保持本產(chǎn)品的最佳使用效果,不宜將其過(guò)夜放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。4.請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用本產(chǎn)品,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.樣本需為腫瘤術(shù)中樣本,且腫瘤細(xì)胞比例越高(至少>50%),培養(yǎng)成功率越高,不推薦用于少量樣本(如穿刺或者循環(huán)腫瘤細(xì)胞)的培養(yǎng)。

6.本產(chǎn)品僅用于科研用途,不能用于體外診斷。


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