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實驗抗生素該如何的選擇?

 更新時間:2024-02-22    點擊量:677

現代實驗室研究的細胞多以原核細胞、真核細胞為主,為了獨立研究某類細胞,需要抑制其他類型細胞的增殖,例如養(yǎng)293T時加青霉素/鏈霉素,抑制潛在的原核細菌增殖,但又不影響293T的功能。那么你知道該如何選擇實驗抗生素嗎?讓我們一起來看看吧!

一、抗生素機制

 1. DNA復制:在DNA聚合酶作用下,DNA自身得到復制,有絲分裂時每個細胞一套DNA;

2. 轉錄、RNA形成過程:在RNA聚合酶催化下,以DNA模板鏈合成RNA的過程,產生mRNA;

3. 蛋白合成過程:mRNA在核糖體中作為模板,tRNA運輸氨基酸,合成多肽或者蛋白質;

4. 細胞膜完整性:細胞膜是防止細胞外物質自由進入細胞的屏障,它保證了細胞內環(huán)境的相對穩(wěn)定,使各種生化反應能夠有序運行。

5. 細胞壁完整性:原核單細胞生物需要有細胞壁,細胞壁位于菌細胞的最外層,包繞在細胞膜的周圍,保持細胞正常形態(tài)不受機械力、滲透壓失衡造成的細胞膜破裂。

二、實驗抗生素的選擇

(1)抑制RNA的轉錄和DNA復制:抑制核酸的功能阻止了細胞分裂/或所需酶的合成,有博來霉素(Zeocin)、利福平(Rifampin)等。

(2)干擾蛋白質合成:干擾蛋白質的合成中核糖體的組裝,例如競爭結合大小亞基,抗生素包括四環(huán)素類、鏈霉素、氯霉素(為了增加質粒產量使用)、新霉素、慶大霉素、卡那霉素、嘌呤霉素(puromycin)。、抑制真核細胞蛋白質合成的有遺傳霉素(G418)。

(3)破壞細胞膜結構:一些抗菌素與細胞的細胞膜相互作用而影響膜的滲透性,這對細胞具有致命的作用。以這種方式作用的抗生素有多粘菌素(polymyxin)、短桿菌素。

(4)抑制細菌細胞壁的合成:抑制細胞壁的合成會導致細菌細胞破裂死亡,抗生素特征是β-內酰胺類抗生素,有氨芐青霉素、卡唑霉素,哺乳動物的細胞例如293T、CHO等沒有細胞壁,不受這些藥物的影響。

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