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  • PCR/qPCR耗材選擇——一般特征篇

    2023-02-13 (1)規(guī)格常見的PCR/qPCR耗材規(guī)格如下管:0.5mL,0.2mL,0.1mL96孔板:0.2mL,0.1mL384孔板:0.02mLPCR/qPCR管/板的規(guī)格決定了反應(yīng)體積。如果加入過多的樣品,一方面會導(dǎo)致熱傳導(dǎo)的效率下降,另一方面會導(dǎo)致樣品溢出或者污染;如果加入的樣品過少,又會因為頻繁的熱循環(huán)導(dǎo)致水分蒸發(fā),進而導(dǎo)致體系不足、樣品損耗,實驗出現(xiàn)誤差或者無結(jié)果。并且選用的耗材需根據(jù)PCR儀的加熱模塊來決定,以求最DA程度的熱傳導(dǎo)的匹配。(2)高度PCR/qPCR管/板有...
  • PCR/qPCR耗材選擇——材料及顏色篇

    2023-02-09 目前市場上大多數(shù)PCR/qPCR管材選用的是聚丙烯材料。聚丙烯是一種惰性的有機材料,對反應(yīng)物質(zhì)的吸收值最小,并且聚丙烯可以承受PCR過程中的溫度變化,在經(jīng)過溫度變化后不易變形,因此可以確保獲得最佳的PCR結(jié)果。在生產(chǎn)過程中,為了保證生物兼容性、純度以及批次間的一致性,應(yīng)當(dāng)使用全新的醫(yī)學(xué)級的分子生物學(xué)級別的高品質(zhì)的聚丙烯作為原料進行生產(chǎn)。有些PCR/qPCR板為了配合高通量機器人的操作,需要具有更高強度的邊框來配合機器人的抓取,通常情況下邊框的材料使用的是更高強度的聚碳酸酯。在...
  • 提取FFPE組織中的核酸時的難點

    2023-02-07 使用福爾馬林固定過組織,其組織中的蛋白質(zhì)與核酸(DNA與RNA)會失去生物活性。福爾馬林和石蠟作為固定劑和包埋劑,將細(xì)胞保護在其中,十分影響核酸的提取,并且長時間的保存可能會使樣品中的核酸發(fā)生降解。傳統(tǒng)的方法會使用二甲苯來溶解石蠟,這種有機溶劑高度易燃,在實驗過程中需要先多次使用二甲苯來溶解石蠟,之后需要多次使用乙醇來沖洗殘留的二甲苯。在使用二甲苯溶解石蠟的過程中,大量的二甲苯可能會對核酸造成損傷,進一步加劇核酸的降解;在溶解與沖洗過程中,即使再仔細(xì)也難免將寶貴的組織材料沖掉...
  • 小蝴蝶昆蟲培養(yǎng)基的使用要小心加謹(jǐn)慎

    2023-02-03 小蝴蝶昆蟲培養(yǎng)基的關(guān)鍵是培養(yǎng)基配方的開發(fā),已有多種培養(yǎng)基用于支持昆蟲細(xì)胞系的生長。昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)所用培養(yǎng)基一般均補加FBS,血清提供了細(xì)胞生長過程中所需的營養(yǎng)物質(zhì)和微量元素,使細(xì)胞能健康生長和傳代。但是FBS的使用也存在著缺點:價格高;每批血清的質(zhì)量不同,影響細(xì)胞的生長和病毒復(fù)制;血清中的蛋白影響從培養(yǎng)的上清液中分離和提取重組蛋白,使蛋白的純化更加困難;血清易被支原體污染。由于部分加入胎牛血清或牛血清使典型昆蟲培養(yǎng)基變得很復(fù)雜。因此,無論工業(yè)上或?qū)W術(shù)上,開發(fā)無血清培養(yǎng)基都是必然...
  • CELLSCRIPT™體外加帽試劑盒工作原理

    2023-02-01 CELLSCRIPT™的使命是提供好的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)品和技術(shù),用于制造和使用RNA以便進行臨床研究和治療的細(xì)胞翻譯。目前的產(chǎn)品包括多種體外轉(zhuǎn)錄試劑盒、加帽類似物或加帽酶的5'RNA加帽試劑盒和3'RNA多聚腺苷酸化的試劑盒,以及用于轉(zhuǎn)錄、加帽、poly(A)尾mRNA以進行翻譯的多合一試劑盒。其中,ScriptCap™Cap1CappingSystem(C-SCCS1710)包含ScriptCap加帽酶、ScriptCap2'-O-甲基轉(zhuǎn)移酶、GTP和SAM等...
  • ALZET泵的原理

    2022-12-10 ALZET泵的簡介:當(dāng)泵體被植入動物體內(nèi)時,由于滲透壓差迫使體液透過泵表面的半透膜流向高滲鹽夾層,擠壓貯藥囊,使藥物按照預(yù)定速度經(jīng)導(dǎo)流管釋放到動物體內(nèi)。、ALZET泵的原理:泵內(nèi)的滲透層與植入泵的組織環(huán)境之間產(chǎn)生滲透壓差。滲透壓泵可被埋植在實驗動物的皮下或者腹腔,滲透層與泵體埋植組織之間高滲透壓導(dǎo)致組織內(nèi)水分從泵的外表面的剛性半透膜流入泵。當(dāng)水進入滲透層時,會壓縮由柔性的非滲透性膜組成的藥池,使測試溶液以可控的、預(yù)定的速率從泵中排出。ALZET泵的適用范圍:可用于大鼠(包括幼...
  • 牛血清的分類

    2022-11-24 牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)基中的中藥成份之一。在培養(yǎng)基中加入適量血清(10%),首先可以補充細(xì)胞生長所需的生長因子、激素、帖附因子等,其次它具有解毒作用,能解除脂肪酸、重金屬和某些蛋白酶的毒性;再次,它還能中止胰酶的作用,并保護細(xì)胞免受機械損傷等。但是血清成分復(fù)雜,不同來源、不同批號生產(chǎn)的血清對細(xì)胞生長作用的差異較大。血清的保存期只有一年,不同存放時期的血清的效力也不同。所以,當(dāng)新購得的血清或要在開始一個重大試驗的時候,應(yīng)首*行牛血清的篩選。篩選時,通常選用正常的二倍體細(xì)胞和不太好養(yǎng)的...
  • Elastin 彈性蛋白/膠原酶是應(yīng)用非常廣泛的消化劑

    2022-11-23 Elastin彈性蛋白/膠原酶是廣泛應(yīng)用的消化劑,胰蛋白酶是一種胰臟制品,對蛋白質(zhì)有水介作用,主要作用于賴氨酸或精氨酸相連接的肽鍵,使細(xì)胞間質(zhì)中的蛋白質(zhì)水介而使細(xì)胞分散開,在常用的蛋白酶中由于產(chǎn)品的活力和純度不同,對細(xì)胞的消化能力也不同,胰蛋白酶對細(xì)胞的作用,取決于細(xì)胞類型、酶的活力、配制的濃度、消化的溫度、無機鹽離子、pH以及消化時間的長短等。是一種從細(xì)菌中提取出來的酶,對膠原有很強的消化作用,適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織,它對細(xì)胞間質(zhì)有較好的消化作用,對細(xì)胞本身...
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