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什么是原代細胞培養和細胞生長曲線？
2023-09-13 你知道什么是原代細胞培養，和細胞生長曲線嗎？，讓我們一起來看看吧！一、原代細胞培養原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首ci培養，也叫初代培養。原代培養離體時間短，遺傳性狀和體內細胞相似，適于做細胞形態、功能和分化等研究。較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養，此時的細胞保持原有細胞的基本性質，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數。但實際上，通常把第一代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。最chang用的原代培養有組織塊培養和分散細胞培養。二、細胞生長曲線細胞生長曲線是測定細...
熒光定量PCR的原理是什么？
2023-09-12 熒光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR擴增反應體系中加入熒光基團，通過對擴增反應中每一個循環產物熒光信號的實時檢測,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。那么你知道熒光定量PCR的原理是什么嗎？讓我們一起來看看吧！以探針法熒光定量PCR為例：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。開始時，探針完整地結合在DNA任意一條單鏈上，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收，檢測不到熒光信號...
細胞傳代的實驗步驟是什么？有何注意事項？
2023-09-12 在細胞培養過程中，去除原培養基并將細胞從原培養體系轉移到新鮮的培養基中，維持細胞的活力與增殖。細胞傳代既可以擴大細胞培養量，也能夠避免細胞因進入平臺期而出現生長抑制甚至死亡的情況。那么你知道細胞傳代的實驗步驟是什么嗎？有何注意事項呢？讓我們一起來看看吧！一、實驗步驟1.貼壁細胞的傳代:1)倒置顯微鏡下觀察細胞形態及密度，評估細胞的狀態，以作為傳代比例的參考。2)提前紫外殺菌（至少30min為宜）操作臺及實驗材料。3)注意無菌操作，在操作臺中吸除或倒掉培養皿內舊培養液（盡可能去...
如何選擇蛋白表達系統？
2023-09-11 在蛋白表達系統的相關研究中，從頭合成蛋白質并不是一個可行的選擇。因此需要借助活細胞或細胞器用作生產和構建蛋白質的工廠。那么你知道該如何選擇蛋白表達系統嗎？讓我們一起來看看吧！目前，較為主流的表達宿主有大腸桿菌（E.coli）、畢赤酵母（P.pastoris）、昆蟲-桿狀病毒（Bac-to-Bac系統）以及哺乳動物細胞系（CHO、HEK293）等。一、細菌優點：1.遺傳背景清楚；2.繁殖快、成本低、抗污染能力強；3.表達量高、表達產物分離純化相對簡單、穩定性好；4.商品化的載體...
你知道胎牛血清的用途和應用領域嗎？
2023-09-11 胎牛血清是從胎牛臍帶血中提取的一種生物制品。它是一種黃褐色液體，主要由蛋白質、氨基酸、碳水化合物、脂類、礦物質和生長因子等組成。那么你知道胎牛血清的用途和應用領域嗎？讓我們一起來看看吧！一、細胞和組織培養：胎牛血清是常用的培養基補充物之一，提供細胞生長所需的營養物質、生長因子和調節因子。它能夠維持細胞的適宜環境，促進細胞的增殖和分化，并提高細胞產量和特定細胞類型的功能。二、疫苗和生物制品生產：胎牛血清在疫苗、抗體和生物藥物的生產過程中起著重要的作用。它可以作為培養基的補充物，...
哪些因素影響電轉效率？
2023-09-08 電轉，也稱電穿孔法，是通過脈沖電流在細胞膜上打孔，將外源分子（DNA、RNA、mRNA等）導入真核細胞內，來改變細胞的特性，從而達到改造細胞的目的，是實現細胞基因功能和蛋白質表達研究的重要工具。那么影響電轉效率的因素有哪些呢？讓我們一起來看看吧！一、電轉過程1）電轉的完整操作步驟包括電轉前操作，電轉執行和電轉后培養。在進行電轉前操作時，電轉試劑、細胞與轉染底物要進行混勻，如果混勻時過于激烈，會破壞轉染復合物的形成，從而導致轉染效率降低；2）在進行電轉前操作時，電擊緩沖液的選擇...
超速離心機分為哪幾類？主要應用于什么？
2023-09-08 超速離心機是一種精密和*的離心機，它以極gao的速度運行并分離出傳統離心機無法分離的較小分子。那么超速離心機分為哪幾類呢？主要應用于什么呢？讓我們一起來看看吧！一、分析型超速離心機（AUC）顧名思義，分析離心機是用于分析樣品中存在的各種顆粒的超速離心機。分析超速離心(AUC)是一種用于定量分析溶液中大分子的通用且穩健的方法這些超速離心機具有檢測系統，可實時監測顆粒的旋轉和位置，以確定沉降系數，這有助于根據形狀、大小和質量分析顆粒。用于測定大分子的相對分子質量的分析超速離心可以...
蛋白質純化有哪些步驟呢？
2023-09-06 蛋白質純化是利用基因工程技術將編碼蛋白質的核酸序列導入宿主細胞，使其大量表達，然后采用合適的純化方法進行體外純化，以獲得高純度、高活性和高產量的蛋白質的過程。那么你知道蛋白質純化操作步驟嗎？讓我們一起來看看吧！1、構建原核表達質粒：目的基因PCR，載體酶切，連接，轉化，挑單克隆送測序；2、將構建成功的質粒轉化到BL21（DE3）中，37℃培養過夜，挑單克隆小搖過夜；3、小誘導摸索最佳誘導條件：將搖過夜的菌液1:1000接種到3mLLB中，37℃搖4-5h至菌液OD600=0....

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